编者按
多序列比对主要用来构建系统发育树或者分子树，在建树之前都需要进行多序列比对，muscle是多序列比对中一款老牌工具，比clustalw使用起来简单一些，直接敲命令就可以。
一、功能分类：
多序列比对
二、软件官网：
三、软件介绍:
MUSCLE(Multiple Protein Sequence Alignment)。它是一款非常简单好用的软件，muscle也是肌肉的意思，也寓意此款软件功能强劲有力。
muscle是在2004年公布的一款蛋白质水平多序列比对的开源软件，在速度和精度上都优于ClustalW。比对速度快。因此在进行多序列比对的时候，大多数情况下可以优先使用Muscle。例如Mega等软件里面也集成了muscle的多序列比对。
Muscle同样可以用于DNA的多序列的比对。使用起来十分方便，大多数情况下用户只需要指定输入输出文件即可。它是适合于多序列比对，多个序列之间具有同源关系，并且具有同一方向，muscle需要对序列进行拉伸，例如适合同一个或多个看家基因、16s等放在一起比对。我们同样也可以将多样品的SNP结果连接起来进行多序列比对，做系统发育分析。所以对于我们使用muscle主要需要做的就是将输入文件格式化为满足muscle输入即可，主要就是fasta格式。
四、下载安装：
wget http://www.drive5.com/muscle/downloads3.8.31/muscle3.8.31_i86linux64.tar.gz
tar -zxvf muscle3.8.31_i86linux64.tar.gz
mv muscle3.8.31_i86linux64 muscle五、软件使用：
选项参数：
-in 输入文件，必须为fasta 格式的序列文件
-out 输出文件，默认输出为mfa格式
-diags 适用于输入序列同源性比较高的序列
-maxiters 最大迭代次数，默认为16
-maxhours 最长迭代时间，默认无限制
-clw 输出CLUSTALW 格式的结果
-clwstrict 同-clw，输出文件的头部包含 “CLUSTAL W (1.81)” 字样
-html 输出HTML 格式结果
-msf 输出msf 格式结果
-log[a] 日志文件，-loga 表示添加，-log 则直接覆盖已有日志文件
-quiet 不要向标准错误流打印进度信息
-stable 按着输入文件中
-group 按着序列的相似度
-version 版本信息
六、使用案例：
现有一个包含多序列的fasta格式文件multi.fasta
muscle -in multi.fasta -out ex1.mfa
muscle -in multi.fasta -out ex1.clw -clw七、注意事项：
1、Muscle是多序列比对软件，它与Blast和Mummer是完全不同的，这些工具适合全基因组比对；
2、序列的方向要一致；