The tad operons encode the machinery required for adhesive Flp (fimbrial low-molecular-weight protein) pili biogenesis. Vibrio vulnificus, an opportunistic pathogen, harbors three distinct tad loci. Among them, only tad1 locus was highly upregulated in in vivo growing bacteria compared to in vitro culture condition. To understand the pathogenic roles of the three tad loci during infection, we constructed single, double and triple tad loci deletion mutants. Interestingly, only the Δtad123 triple mutant cells exhibited significantly decreased lethality in mice. Ultrastructural observations revealed short, thin filamentous projections disappeared on the Δtad123 mutant cells. Since the pilin was paradoxically non-immunogenic, a V5 tag was fused to Flp to visualize the pilin protein by using immunogold EM and immunofluorescence microscopy. The Δtad123 mutant cells showed attenuated host cell adhesion, decreased biofilm formation, delayed RtxA1 exotoxin secretion and subsequently impaired translocation across the intestinal epithelium compared to wild type, which could be partially complemented with each wild type operon. The Δtad123 mutant was susceptible to complement-mediated bacteriolysis, predominantly via the alternative pathway, suggesting stealth hiding role of the Tad pili. Complement depletion by treating with anti-C5 antibody rescued the viable count of Δtad123 in infected mouse bloodstream to the level comparable to wild type strain. Taken together, all three tad loci cooperate to confer successful invasion of V. vulnificus into deeper tissue and evasion from host defense mechanisms, ultimately resulting in septicemia.

中文翻译：

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隐性粘附因子有助于创伤弧菌的致病性：Flp菌毛在宿主入侵，血液中的存活以及对补体激活的抵抗中发挥作用。

tad操纵子编码粘附性Flp（纤维低分子量蛋白）菌毛生物发生所需的机制。创伤弧菌是一种机会致病菌，带有三个不同的tad基因座。其中，与体外培养条件相比，在体内生长的细菌中只有tad1基因座高度上调。为了了解三个tad基因座在感染过程中的致病作用，我们构建了一个，两个和三个tad基因座缺失突变体。有趣的是，只有Δtad123三联突变细胞在小鼠中显示出显着降低的致死率。超微结构观察表明，Δtad123突变细胞上短而细的丝状突起消失了。由于菌毛蛋白具有悖论性的非免疫原性，因此通过使用免疫金EM和免疫荧光显微镜检查，将V5标签融合到Flp上以观察菌毛蛋白。与野生型相比，Δtad123突变细胞显示减弱的宿主细胞粘附力，减少的生物膜形成，延迟的RtxA1外毒素分泌以及随后的肠上皮转运障碍，这可以与每种野生型操纵子部分互补。Δtad123突变体主要通过替代途径易受补体介导的细菌分解作用，表明Tad菌毛的隐身隐藏作用。通过用抗C5抗体治疗的补体耗竭将感染小鼠血流中的Δtad123的存活计数恢复到与野生型毒株相当的水平。总体而言，这三个tad位点共同协作，成功地使V. vulnificus入侵到更深的组织中，并逃避了宿主防御机制，最终导致败血症。与野生型相比，减少了生物膜的形成，延迟了RtxA1外毒素的分泌并随后损害了肠上皮的转运，这可以与每种野生型操纵子部分互补。Δtad123突变体主要通过替代途径易受补体介导的细菌分解作用，表明Tad菌毛的隐身隐藏作用。通过用抗C5抗体治疗的补体耗竭将感染小鼠血流中的Δtad123的存活计数恢复到与野生型毒株相当的水平。总体而言，这三个tad位点共同协作，成功地使V. vulnificus入侵到更深的组织中，并逃避了宿主防御机制，最终导致败血症。与野生型相比，减少了生物膜的形成，延迟了RtxA1外毒素的分泌并随后损害了肠上皮的转运，这可以与每种野生型操纵子部分互补。Δtad123突变体主要通过替代途径易受补体介导的细菌分解作用，表明Tad菌毛的隐身隐藏作用。通过用抗C5抗体治疗的补体耗竭将感染小鼠血流中的Δtad123的存活计数恢复到与野生型毒株相当的水平。总体而言，这三个tad位点共同协作，成功地使V. vulnificus入侵到更深的组织中，并逃避了宿主防御机制，最终导致败血症。与野生型相比，RtxA1外毒素的分泌被延迟，随后在肠上皮的转运受到损害，这可能与每种野生型操纵子部分互补。Δtad123突变体主要通过替代途径易受补体介导的细菌分解作用，表明Tad菌毛的隐身隐藏作用。通过用抗C5抗体治疗的补体耗竭将感染小鼠血流中的Δtad123的存活计数恢复到与野生型毒株相当的水平。总体而言，这三个tad位点共同协作，成功地使V. vulnificus入侵到更深的组织中，并逃避了宿主防御机制，最终导致败血症。与野生型相比，RtxA1外毒素的分泌被延迟，随后在肠上皮的转运受到损害，这可能与每种野生型操纵子部分互补。Δtad123突变体主要通过替代途径易受补体介导的细菌分解作用，表明Tad菌毛的隐身隐藏作用。通过用抗C5抗体治疗的补体耗竭将感染小鼠血流中的Δtad123的存活计数恢复到与野生型毒株相当的水平。总体而言，这三个tad位点共同协作，成功地使V. vulnificus入侵到更深的组织中，并逃避了宿主防御机制，最终导致败血症。Δtad123突变体主要通过替代途径易受补体介导的细菌分解作用，表明Tad菌毛的隐身隐藏作用。通过用抗C5抗体治疗的补体耗竭将感染小鼠血流中的Δtad123的存活计数恢复到与野生型毒株相当的水平。总体而言，这三个tad位点共同协作，成功地使V. vulnificus入侵到更深的组织中，并逃避了宿主防御机制，最终导致败血症。Δtad123突变体主要通过替代途径易受补体介导的细菌分解作用，表明Tad菌毛的隐身隐藏作用。通过用抗C5抗体治疗的补体耗竭将感染小鼠血流中的Δtad123的存活计数恢复到与野生型毒株相当的水平。总体而言，这三个tad位点共同协作，成功地使V. vulnificus入侵到更深的组织中，并逃避了宿主防御机制，最终导致败血症。