2.3光谱技术

一.光学知识

1.光线有不同的波长，肉眼可见的光称为可见光，它的波长范围是400~ 750 nm

小于400 nm的光线称为紫外线；大于750nm的光线称为红外线。

物质对光线具有选择性的吸收作用，每种物质都具有其特征性的吸收光谱

光谱记录的就是电磁辐射的波长与其发射或者吸收的强度。

2.光谱的分类

（1）发射光谱：指构成物质的分子、原子或者离子受到热能、电能或者化学能的激发而产生的光谱。

（2）吸收光谱：指物质吸收光源辐射所产生的光谱。紫外光谱就是典型的吸收光谱。所有利用光谱记录吸收值的实验方法都可认为是分光光度法。这是利用物质所特有的吸收光谱鉴定物质或者测定其含量、性质、组成和结构的一种技术。在分光光度法中，物质吸收光线的能力遵循朗伯比尔定律

在上面的公式中，A为物质在特定波长下的光吸收值，e是待测物质的摩尔吸收系数，l是光程长度；C是待测物质的浓度。

二.光谱技术

1.紫外可见吸收光谱

属于吸收光谱，常用的紫外光谱一般包括紫外和可见两个光区，波长在200~800nm。这种吸收光谱是由于价电子和分子轨道上的电子在电子能级上的跃迁所产生的，具有不同分子结构的各种物质有对电磁辐射选择性吸收的特性。生物大分子大部分都具有生色团和助色团，因此都具有紫外特征吸收。而大多数的定量实验或酶活性鉴定、产物的生成都伴随了生色反应。因此可以借助紫外可见吸收光谱进行定量检测。

2.紫外分光检测仪器的构成

大部分紫外分光检测仪器都由光源、单色器、吸收池、检测器和信号指示系统等部分组成